試劑、試劑盒 |
消毒劑(次氯酸鹽)清潔劑
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儀器、耗材 |
浸泡池試管刷不銹鋼籃子鋁箔無菌指示器無菌指示膠帶或塞滅菌烤箱
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實驗步驟 |
一、玻璃器皿的收集和清洗
1. 玻璃器皿用后要立即將其收集到含有消毒劑(次氯酸鹽,用清潔劑稀釋,**少應含有300 μg/g 的氯,如常規用的次氯酸鈉) 的清潔劑(如,7× 或Decon)中。在浸泡或清洗前jue不能讓玻璃器皿變干,否則會非常難清洗。 2. 在清潔劑中浸泡過夜。 3. 漂洗: (a) 次日早,用試管刷手工刷洗或機器刷洗玻璃器皿,自來水沖洗 4 次后用去離子水沖洗 3 次。保持水流噴射非常有必要,否則每次都要將瓶子裝滿后再倒空。將許多瓶子固定在籃子中會使沖洗速度加快。 (b) 機器清洗不需要清潔劑。如果接一個龍頭,則可減少兩次自來水沖洗和一次去離子水沖洗的過程。 4 . 在徹底沖洗之后,將瓶子倒置在不銹鋼籃子(盛放漂洗過的玻璃器皿然后晾干)中烘干。 5 . 冷卻后用鋁箔封口保存。 二、玻璃器皿的消毒 1. 在玻璃器皿上貼上小正方形的無菌指示膠帶(這與高壓滅菌器中的無菌指示膠帶不同 ,因為烤箱中的溫度更高。大多數高壓滅菌器中的無菌指示膠帶會烤焦,黏合劑中的易爆炸成分就會殘留在烤箱和玻璃器皿中。)或其他的指示標簽,并寫上日期。 2. 將玻璃器皿放人烤箱(在有風扇的情況下溫度可以達到160°C ,宜使用可記錄溫度計和易彎曲的探針)中,烤箱應有可循環空氣的風扇,并將溫度設定在 160°C 。 3. 確保烤箱的中央溫度達到160°C: (a) 將一個無菌指示器(Alpha Medical 適用于干熱或蒸汽消毒,Thermalog 指示器只適用于蒸汽消毒)放人瓶中或其他器皿內,置于烤箱中央。 (b) 如果用可記錄的麵計,將感應部分放入瓶中或其他器皿內,符于烤箱中央。 (c) 不要將物品堆得過緊,要留出熱空氣對流的空間。 4. 將烤箱蓋好,檢杳溫度旋鈕是否在 160°C ,用膠帶將烤箱封好并按預定時間保持 1h (或用自動鎖和自動記錄儀)。 5. 1h 后將電源關掉,不開箱冷卻。如果有自動計時器則非常方便,因為它晚上能自動斷電,次日早就可以繼續實驗。這樣做可使冷卻在無菌的環境中進行,也使白天產生的熱量降低到**少。 6 . 消毒的玻璃器肌要在 24~48h 內使用。
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注意事項 |
1. 有機物要放在烤箱外面。不要用紙質的膠帶或包裝材料,除非你能確定其加熱時不會產生爆炸性物質。這些物質**終會留在烤箱中,加熱時會產生氣味,有的會殘留在消毒過的玻璃器皿中。
2. 用 121°C高壓滅菌20min,要經過一個前真空和后真空的循環,可以將瓶子的螺口蓋松開或用鋁箔包住口后再用高壓滅菌膠帶粘住。待冷卻后,再將松開的瓶蓋擰緊。在高壓滅菌的過程中,瓶蓋應擰得非常松(擰一圈即可),這樣做是為了讓蒸汽進人瓶中,也能阻止墊片(如果有)被瓶蓋吸住而堵住瓶口。在高壓滅菌器的滅菌過程中如果瓶口被堵住,會導致滅菌不完全。不幸的是,在高壓滅菌過程中經常會出現薄霧,在薄霧蒸發的過程中會在瓶中留有殘留物。同時瓶子在密封之前,冷卻的時候也可能被未消毒的空氣所污染。干熱滅菌相對好一些,因為它可以使瓶子在移動之前在烤箱中直接冷卻。 |